УДК 541.13; 616.31

ФАРМАКОЛОГИЧЕСКАЯ ЭФФЕКТИВНОСТЬ ДЕЙСТВИЯ АНОЛИТОВ АН и АНК НА СЛИЗИСТЫЕ ОБОЛОЧКИ РОТОВОЙ ПОЛОСТИ

В.В. Торопков, Э.Б. Альтшуль, О.И. Пересыпкин

Санкт-Петербургский государственный университет (медицинский факультет),

Научно-технический центр технологий ЭХА,
Санкт-Петербургская государственная медицинская академия.

Нейтральные анолиты АН и АНК, получаемые на установках СТЭЛ, являются эффективным антимикробным средством в отношении условно-патогенных и патогенных микроорганизмов, вызывающих гнойно-воспалительные процессы полости рта. Антимикробная терапевтическая доза нейтральных анолитов составляет 2,0 - 2,5 мг/дм³ при экспозиции 5 - 10 минут при использовании анолитов для полоскания полости рта и глотки.

   Анолит, ротовая полость, гнойные заболевания, лечение

В настоящее время в лечебно-профилактической практике используются вещества - окислители: перманганат калия и перекись водорода, обладающие антимикробным действием. Однако широкое их использование ограничено относительно малой активностью и эффективностью.

Анолиты, имеющие ярко выраженные окислительно-восстановительные свойства, безусловно представляют интерес в качестве потенциальных средств для использования в лечебно - профилактической практике, в частности в выше обсужденных случаях.

Целью данного исследования явилось изучение возможности использования анолитов АН и АНК в целях лечения и профилактики гнойно-воспалительных заболеваний ротовой полости и глотки при использовании их в качестве полосканий.

Исследования и испытания анолитов АН и АНК проводили в соответствии с требованиями и положениями "Правил доклинической оценки безопасности фармакологических средств", а так же с использованием методов и приемов исследований, обследований и наблюдений, связанных со спецификой изучаемых веществ. При этом использовались официальные регламентированные приемы и методы исследований.

Изучение спектра и концентраций анолитов, действующих в отношении микроорганизмов изучали с использованием бактериологического метода. В качестве лабораторной коллекции микроорганизмов использовались эталонные культуры микроорганизмов и выделяемые из полости рта и глотки. Причем использовались и изучались как патогенные, так и условно-патогенные микроорганизмы - потенциальные возбудители гнойно-воспалительных процессов полости рта и глотки. В коллекцию микроорганизмов, использованных для испытания анолитов, входили следующие виды микроорганизмов: Staph. aureus (штамм 209), а так же патогенные стафилококки, выделенные из полости рта и носоглотки носителей или больных (6 штаммов), Candida albicans (штамм СТС 885-653), E. coli (штамм М-17), Рs. aeruginosa, Str. haemolyticus, Neisseria sp., Str. faecalis. Для исключения штаммовариабельности поведения микроорганизмов, испытывалось по 3 - 6 штаммов микроорганизмов. Микроорганизмы культивировали на соответствующих им питательных средах.

В связи с использованием анолитов для полоскания полости рта и носоглотки оценивался местный иммунитет полости рта. Определяли секреторный иммуноглобулин A IgSA и лизоцим слюны. Определения проводились с помощью волонтеров, использовавших растворы анолитов АН и АНК для полоскания полости рта и глотки. Секреторный иммуноглобулин определяли по методу Манчини, лизоцим слюны - нефелометрическим методом с использованием микрококка лизодеиктикус.

Для оценки воздействия анолитов на полость рта были приглашены волонтеры. Группа включала 27 человек (18 женщин и 9 мужчин) в возрасте от 21 года до 43. После использования анолитов для полоскания давалась органолептическая их характеристика, собирался анамнез об ощущениях при проведении обследования. Брался буккальный эпителий до и после обследования для оценки цитологических характеристик.

С целью представления антимикробного механизма и характера действия анолитов мы начали исследование с внесения чистых культур микроорганизмов в цельные анолиты с содержанием активного хлора в дозах 300 - 400 мг/дм³. Установлено, что при испытанных концентрациях анолиты АН и АНК обладают бактериолитическим действием в отношении всех испытанных видов микроорганизмов.

Следующие серии испытаний мы проводили исходя из принципа выбора начальной минимальной дозы анолитов, по аналогам, используемым в практике хлорсодержащих веществ. Испытания проводились со следующими концентрациями анолитов: 1,5; 2,0; 2,5; 3,0; 3,5 мг/дм³. В результате установлено, что анолиты АН и АНК во всех испытанных концентрациях обладают бактерицидным действием. То есть, убивают микроорганизмы, не нарушая их структуры и морфологии.

Таким образом, в результате исследования установлено, что анолиты АН и АНК обладают в эксперименте с чистыми культурами достаточно широким антимикробным спектром действия, в отношении грамположительной, грамотрицательной кокковой и бактериальной флоры, а так же в отношении дрожжеподобных грибов рода Кандида.

Минимальная действующая концентрация анолитов, обладающая бактерицидным действием составляет 1,5 мг/дм³, при минимальном времени контакта с микроорганизмами, достаточного для проявления бактерицидного действия - 5 минут.

При использовании анолитов с целью полоскания полости рта и глотки приводит к непосредственному воздействию на буккальный эпителий и слизистые полости рта. При этом испытывали анолиты АН и в концентрациях по активному хлору в 1,5; 2,0; 2,5; 3,0; 3,5 мг/дм³.

Результаты исследования показали, что анолиты АН и АНК практически одинаково действуют на клетки буккального эпителия, снижая их число, содержащих гликоген, а также приводя к уменьшению гликогена в клетках. При микроскопии препаратов буккального эпителия, окрашенных по Романовскому-Гимза отмечена вакуолизация цитоплазмы всех клеток при использовании анолитов в концентрации 3,5 мг/дм³.

Полученные данные позволяют считать концентрацию анолитов АН и АНК 2,0 - 2,5 мг/дм³ как безопасную по действию на ферментную и энергетическую систему клеток эпителия полости рта.

Микроорганизмы, представители как нормальной микрофлоры полости рта, так и патогенные находятся в тесной взаимосвязи с клетками, прикрепляясь и размножаясь на их поверхности за счет адгезивной способности.

Характер ее изменения в буккальном эпителии под воздействием анолитов представляет большой интерес, как с точки зрения представления механизма действия анолитов, так и их значения в воздействии на микрофлору.

Анолиты АН и АНК обладают практически равной десорбционной способностью. Представлять, что это происходит за счет бактериолитического действия анолитов не правомерно. Клетки буккального эпителия сохраняют свою морфологию, как и бактериальные клетки. Выше же было показано, что анолиты только при высокой концентрации активного хлора (практически цельный анолит) проявляют бактериолитическое действие.

Анолиты АН и АНК обладают высокой окислительно-восстановительной способностью. Возможно, что в основе установленных явлений лежит снижение окислительно-восстановительного потенциала среды. В результате этого снимается электрический заряд клетки как микроорганизма, так и эпителия, что и приводит к десорбции микроорганизмов. Данное явление, безусловно следует рассматривать как положительное, обеспечивающее очищение поверхности эпителия и слизистых от патогенных и условно-патогенных возбудителей гнойно-воспалительных процессов. Однако увеличение концентрации анолитов приводит к проявлению их неблагоприятного воздействия на клетки и ткани человека.

Оценка влияния анолитов на факторы местного иммунитета имеет большое практическое и теоретическое значение. Наиболее мощными гуморальными факторами местного иммунитета являются лизоцим и секреторный иммуноглобулин А (sIgA), определяемые в слюне. Нами изучено поведение этих двух факторов под воздействием анолитов АН и АНК.

Результаты исследований показали, что лизоцим слюны однотипно реагирует на действие обоих анолитов. С увеличением концентрации анолитов уменьшается концентрация лизоцима, вплоть до его полной инактивации при дозе активного хлора 3,5 мг/дм³. Оптимальные дозы анолитов, не вызывающие значительного снижения лизоцима составляют 2,0 - 2,5 мг/дм³. Секреторный иммуноглобулин в слюне инактивируется так же и в такой же закономерности как и лизоцим, снижая свою концентрацию под повышающимися дозами анолитов. Примечательно, что дозы, составляющие 2,0 - 2,5 мг/дм³ активного хлора являются предельными для выраженной активации секреторного иммуноглобулина.

Действие анолитов было проверено нами на волонтерах, которые использовали анолит для полоскания полости рта и глотки. Для полоскания предлагался раствор анолита АН или АНК в объеме 200 мл с концентрацией активного хлора 2,0 - 2,5 мг/дм3. Полоскание проводилось в течение 5 - 10 минут. Анолит не заглатывался, а сплевывался после каждого очередного полоскания полости рта и глотки. Бактериологическое количественное исследование смывов с щек и глотки показало уменьшение степени микробной их обсемененности в 25 - 100 раз. Повторное бактериологическое обследование 4 человек показало, что достигнутый низкий уровень обсемененности полости рта и глотки держится по крайней мере 2 - 3 часа.

ВЫВОДЫ

1. Нейтральные анолиты АН и АНК, получаемые на установках СТЭЛ, являются эффективным антимикробным средством в отношении условно-патогенных и патогенных микроорганизмов, вызывающих гнойно-воспалительные процессы полости рта.
2. Антимикробная терапевтическая доза нейтральных анолитов составляет 2,0 - 2,5 мг/дм³ при экспозиции 5 - 10 минут при использовании анолитов для полоскания полости рта и глотки.