3.4. Биохимические изменения в ранах под воздействием ЭВР.

     В первые  сутки  после  операции биохимические показатели в ранах опытной и контрольной групп особенно не изменялись.      Через сутки после операции в группе,  обработанной ЭАВР, содержа- ние глюкозы было ниже на 25%,  чем в контроле. В коже, окружающей рану уменьшалась соответственно на 10%.  На 3-е сутки произошло резкое уве- личение глюкозы в глюкозы в контролем и превысило концентрацию послед- ней на 20%. В коже произошло равномерное увеличение содержания глюкозы как в контрольной группе,  так и в опытной. На 7-е сутки еще прослежи- вается различие между опытной и контрольной группами,  которое практи- чески не определялось к 14-м суткам после операции (табл.3.9)      Изменения касались также и метаболитов глюкозы. Содержание лакта- та в тканях ран,обрабатываемых ЭВР,  в первые трое суток было  значи- тельно ниже, чем в контрольной. Через сутки после нанесения дефекта-на 13%,а на 3-е -21%.  В коже,окружающей раны,в эти же  сроки  содержание лактата было выше у опытной группы,соответсвенно на 45 и 35%.  В даль- нейшем концентрация лактата в ранах опытной  группы  снижалась  значи- тельно  медленнее,чем в контрольной.  В коже концентрация лактата про- должала увеличиваться в течение 2-х недель после операции (табл.3.3).      Содержание пирувата  в тканях ран умеренно возрастало к 7- м сут- кам в обеих группах.  К концу второй недели после операции происходило его снижение (табл.3.9).      Изучение ферментов углеводного обмена показало следующее:  актив- ность  гликолитического фермента лактатдегдрогеназы (ЛДГ) в тканях ран опытной группы в первые сутки возросла на 12% по сравнению с контроль- ной  группой.  На  3-и  сутки  отмечено снижение активности фермента в опытной группе на 26%.  В дальнейшем активность ЛДГ вновь повысилась в ранах, обрабатываемых ЭВР, оставаясь на 14 суток выше контроля. В ко- же активность фермента резко снизилась в опытной групп на 3-е сутки на 25%,  по отношению к контролю. В остальные же сроки наблюдений показа- тели активности ЛДГ в опытной и контрольной группах существенно не от- личались (табл.3.10).      Активность ферментов пентозного цикла повысилась в первые сутки в тканях  ран,  обрабатываемых  ЭВР,  оставаясь таковой до конца сроков наблюдений. В коже,окружающей раны, в первые сутки отмечено увеличение актвности  глюкозо-6-фосфата  (Г-6-Ф) в контрольной группе.  К третьим суткам происходит выравнивание фермента в опытной контрольной группах. На  14-е  сутки  обнаруживалось  повышение  активности Г-6-Ф в опытной группе, по сравнению с контрольной на 35% (табл.3.10).      Активность другого  фермента  пентозного цикла-транскеталазы воз- росла в первые сутки после операции в опытной группе  по  сравнению  с контрольной  на 17%.  В дальнейшем активность этого фермента в группе, обрабатываемой ЭВР, превышала контрольные показатели, но незначитель- но. В коже, окружающей раны, в первые сутки отмечено увеличение актив- ности транскеталазы в опытной группе.  В последующие сроки  показатели активности  фермента  в  опытной  группе были ниже,  чем в контрольной (табл.3.10).      Основные изменения в содержании биогенных аминов (гистамина и се- ротонина) в тканях ран и коже вокруг них происходили на 3 и 7-е  сутки после операции. Так,концентрация гистамина в тканях ран опытной группы на 3-е сутки составляла 4.54+0.3мкг/г,  в  контрольной  1.11+0.16мкг/г (Р/0.001).  Еще большее различие наблюдалось в коже,  окружающей ткани ран - в опытной группе  -  6.64+0.4мкг/г,в  контрольной-1.20+0.01мкг/г (Р<0.001).  Через 7 суток после нанесения ран концентрация гистамина в грануляционной ткани опытной группы снизилась до  1.68+0.08мкг/г,в  то время   как   в   контрольной  отмечено  увеличение  ее-2,04+9.01мкг/г (Р<0.001).      В коже   наблюдалась   аналогичная   картина:   в   опытной-2.04+ +0.15мкг/г, в контрольной-2.43+0.21мкг/г (Р<0.2).      Содержание серотонина  на  3-е  сутки  в грануляционной ткани ран опытной группы было выше,чем в контрольной-2.07+0.8мкг/г, 1.5+0.1мкг/г (Р<0.001). В коже, окружающей раны, наблюдались обратные явления:опыт- ная группа-0.78+0.06мкг/г,контрольная1.62+0.05мкг/г (Р<0.001).  На 7-е сутки  показатели  концентрации  серотонина сохраняли такую же зависи- мость.  В грануляционной  ткани  ран  опытной  группы-0.46+0.20мкг/г,в контрольной   -0.22+   0.006мкг/г  (Р<0.001).  В  коже  соответственно 0.18+0.007мкг/г и 0.32+0.01мкг/г (Р<0.001).      На 3-е  сутки  после  операции  уровень цГМФ в опытной группе был достоверно выше контрольной-108.6+6.94 пмоль/г и 79.7+2.11 пмоль/г.  В содержании  цАМФ  достоверных различий в этот срок не наблюдалось,нес- колько ниже концентрация цАМФ в опытной группе206.7+8.3пмоль/г,в конт- рольной-228.1+18.4пмоль/г.  На  5-е сутки отмечено выраженное снижение цАМФ   в   обеих   группах:опытной-9.47+   1.40пмоль/г,контрольной   - 13.8+0.32пмоль/г     (Р<0.02)    и    увеличение    цАМФ,соответствен- но-221.7+7.03пмоль/г и 256.7+23.7пмоль/г (Р<0.2). На 7-е сутки уровень цГМФ несколько увеличился в группах:опытной-25.3+2.11пмоль/г,контроль- ной-47.4+2.16пмоль/г (Р<0.001). В опытной групп концентрация цАМФ сни- зилась  до  197.2+  9.93пмоль/г,в  контрольной продолжала увеличивать- ся-300,2+11.8 пмоль/г (Р<0.001).  Соотношение цАМФ/цГМФ на 3-е сутки в опытной  группе  было 0.52,тогда как в контрольной-0.34.  На 5-е сутки это соотношение было соответственно 0.04 и 0.05,а на 7-е  сутки  после операции-0.12 и 0.15.      В энергообеспечении высокого  уровня  пролиферации  ведущая  роль принадлежит  АТФ.  Определение  этого макроэрга в грануляционной ткани показало,  что в опытной группе концентрация АТФ на  3-е  сутки  после операции в 5 раз превышала концентрацию в контроле:0.04+0.001млмоль/г, 0.008+0.0001млмоль/г (Р<0.001).  В  коже,  окружающей  раны,в  опытной группе содержание АТФ равнялось 0.11+0.005млмол/г.      Содержание белка в группе  животных,раны  которых  обрабатывались эавр   на  3-е  сутки  после  операции  было:  в  грануляционной  тка- ни-312,2+4.4мг/г,в коже-282.2+18.00.  В контрольной  группе  соответс- твенно-300.0+7.4мг/г и 298.6+14.70мг/г (Р<0.2 и Р<0.5).      Синтез белка,  определяемый по  включению  Н-пролина,  в  опытной группе-в  грануляционной  ткани-386+10.0имп/мин  на мг.  белка,  в ко- же-330+6.0имп/мин на мг белка. В контрольной группе эти показатели бы- ли-265.13+13.0имп/мин на г белка (Р<0.01) b 348+73.0 имп/мин на г бел- ка (Р<0.5).  На 7-е сутки содержание белка в грануляционной ткани  ран опытной  группы  было  357+8.5мг  /г,в  контрольной группе-280+8.1мг/г (Р<0.01).  В коже соответственно 308+6.8мг/г и 196+6.6мг/г  (Р<0.001). На  высоком уровне оставался и синтез белка в грануляционной ткани ран опытной группы-156+12.3 имп/мин на мг белка,  в контрольной -  86+29.6 имп./мин  на  мг  белка  (Р<0.05).  В  коже  вокруг ран соответственно 142+9.4 имп./мин на мг белка и 178+55.5 имп./мин на мг белка (Р<0.5).      Проведенные исследования  выявили накопление глюкозы в грануляци- онной ткани ран,  обрабатываемых ЭВР к третьим суткам после операции. Это,по-видимому,  связано с увеличением кровоснабжения в данной облас- ти,  о чем свидетельствуют проведенные  морфологические  исследования. Избыток  глюкозы способствует усилению гликолитического процесса в ра- не,  как видно по увеличению активности ЛДГ  и  снижению  концентрации продуктов гликолиза.      В первые 3 суток после нанесения ран в грануляционной ткани  ран- топытной группы наблюдаемое улучшение кровоснабжения приводит не толь- ко к увеличению поступления кислорода и полноценному окислению лактата и пирувата, но и вероятно, способствует вымыванию неокисленных продук- тов.  Такие биохимические сдвиги способствуют высокой энергообеспечен- ности  грануляционной  ткани,  обрабатывамых ЭВР.  Это подтверждается 5-тикратным увеличением концентрации АТФ в тканях ран опытной  группы. Электронномикроскопические  исследования показали увеличение числа ми- тохондрий и их размеров в клетках фибробластичнского русла.      Обнаруженное повышение концентрации цГМФ, являющегося посредником сигналов пролиферации в грануляционной ткани опытной группы говорит  о высокой пролиферативной активности фибробластов.  Об этом свидетельст- вует авторадиография-высокие индексы меченых ядер (ИМЯ) фибробластов.      Наряду с  интенсификацией  гликолитического и окислительного про- цессов в ранах опытной группы, направленных на поддержание энергообме- на,  отмечается  и некоторое усиление активности ферментов пентозофос- фатного пути обмена углеводов (ПФП).  Активация ПФП,  главным  образом направлена на обеспечение пластических процессов в ранах,  в том числе синтеза белка.  Это доказывается и повышением включения Н-пролина, ко- торый  является  предшественником синтеза коолагена,  в грануляционной ткани ран опытной группы. Основными коллагенопродуцирующими клетками в ранах являются фибробласты.      Возросшее количество гистамина  в  грануляционной  ткани  опытной группы играет большую роль в дифференцировке фибробластов,способствует усилению синтеза коллагена ими.  Указанные биохимические сдвиги приво- дят  к увеличенному содержанию белка в ранах опытной группы к 7-м сут- кам после операции,  что вероятно свидетельствует в пользу стимулирую- щего действия ЭВР на репаративные процессы в ранах.      Вышесказанное в равной мере относится и к коже вокруг раны, кото- рая  играет  большую  роль в эпителизации дефекта за счет "вставочного роста".      Таким образом,обработка  ран  ЭВР приводит к выраженным биохими- ческим изменениям.  Усиление кровоснабжения активизирует гликолитичес- кие и окислительные процессы,которые в свою очередь приводят к улучше- нию энергетического обмена.  Некоторая стимуляция ПФП обмена углеводов приводит  к  увеличению пластических возможностей грануляционной ткани ран.  Это биохимические изменения,по-видимому,лежат в основе ускорения заживления ран под влиянием воздействия ЭВР.                                          Таблица 3.9.   Содержание ферментов  в  грануляционной  ткани  ран и коже,   окружающей их   -------------------------------------------------------------------                               Грануляционная ткань ран                       1 сутки   3 суток   7 суток    14 суток -------------------------------------------------------------------           контроль    1.95+     1.73+      1.36+      1.42+                       0.051     0.045      0.089      0.063 ЛДГ        опыт       2.14+     1.37+      2.35+      2.03+ нмоль/с/г             0.043     0.038      0.083      0.040             Р         0.05      0.001      0.001      0.001 -------------------------------------------------------------------           контроль    3.29+     2.30+      2.14+      2.06+ Глюкозо-6-            0.202     0.164      0.144      0.083 фосфат     опыт       3.97+     2.74+      3.06+      2.71+                       0.171     0.147      0.109      0.070             Р         0.05       0.2        0.01       0.01 -------------------------------------------------------------------           контроль    18.50+    18.96+    16.92+     13.97+ Транскето-            0.310     0.570     0.070      0.591 лаза        опыт      21.70+    19.06+    16.45+     16.73+ нмоль/с/г             0.421     0.980     0.109      0.700             Р         0.001      0.5       0.02       0.05 ------------------------------------------------------------------                               Кожа вокруг ран                      1 сутки   3 суток    7 суток   14 суток ------------------------------------------------------------------           контроль    2.87+     2.42+     2.14+      1.90+                       0.050     0.140     0.038      0.022 ЛДГ        опыт       2.74+     1.05+     1.97+      1.84+ нмоль/с/г             0.040     0.172     0.041      0.020             Р          0.1      0.001     0.05        0.1 ------------------------------------------------------------------           контроль    3.75+     2.89+     3.10+      3.53+ Глюкозо-6-            0.204     0.284     0.010      0.232 фосфат     опыт       1.35+     2.85+     3.14+      4.79+                       0.244     0.236     0.008      0.212             Р          0.01      0.5       0.05       0.02 ------------------------------------------------------------------           контроль    13.14+    16.37+    18.03+     9.76+ Транскето-            0.500     0.667     0.346      0.244 лаза        опыт      15.54+    11.65+    14.74+     7.47+ нмоль/с/г             0.624     0.489     0.401      0.308             Р          0.05     0.001     0.001      0.001 ------------------------------------------------------------------                                        Таблица 3.10   Содержание глюкозы,лактата и пирувата в грануляционной      ткани ран и кожи,окружающей их ------------------------------------------------------------------                               Грануляционная ткань ран                     1 сутки   3 суток   7 суток    14 суток ------------------------------------------------------------------   1        2          3         4         5           6 ------------------------------------------------------------------          контроль   4.72+     6.72+     5.80+       5.47+                     0.16      0.465     0.158       0.228 Глюкоза   опыт      3.77+     8.40+     6.72+       5.62+ мкмоль/г            0.085     0.350     0.259       0.310            Р        0.001     0.05       0.02        0.05 ------------------------------------------------------------------          контроль   7.33+     7.13+     3.32+       3.55+ Лактат              0.209     0.270     0.165       0.273 мкмоль/г  опыт      6.43+     5.87+     5.62+       4.52+                     0.210     0.125     0.096       0.390            Р         0.01      0.01     0.001        0.05 ------------------------------------------------------------------          контроль   0.08+     0.10+     0.11+       0.11+ Пируват             0.008     0.008     0.125       0.0002 мкмоль/г  опыт      0.085+    0.104+    0.115+      0.060+                     0.0062    0.040     0.0021      0.004            Р         0.5       0.5       0.5        0.001 ------------------------------------------------------------------ лактат/  контроль   91.62     71.30     30.18       118.33 пируват   опыт      75.64     56.44     48.86        75.33 ------------------------------------------------------------------  1         2          3        4          5           6 ------------------------------------------------------------------                               Кожа вокруг ран                     1 сутки   3 суток    7 суток   14 суток ------------------------------------------------------------------          контроль   3.90+     7.46+     6.51+       5.56+                     0.196     0.120     0.310       0.330 Глюкоза   опыт      3.54+     7.65+     7.05+       6.12+ мкмоль/г            0.174     0.665     0.060       0.002            Р        0.02       0.5       0.2         0.1 ------------------------------------------------------------------          контроль   6.99+     7.92+     9.47+       10.62+ Лактат              0.710     0.970     0.240       0.360 мкмоль/г  опыт      10.06+    10.46+    6.65+       7.20+                     0.385     0.670     0.400       0.300            Р         0.01     0.05       0.05       0.001 ------------------------------------------------------------------          контроль   0.07+     0.07+     0.06+       0.06+ Пируват             0.005     0.0003    0.005       0.006 мкмоль/г  опыт      0.078+    0.100+    0.049+      0.050+                     0.0080    0.0003    0.0003      0.0002            Р          0.5      0.001    0.001       0.01 ------------------------------------------------------------------ лактат   контроль   99.85      113.14   157.83      177.01 пируват   опыт      125.75     104.60   135.71      144.00 ------------------------------------------------------------------


Дом.

Главная

Отзывы